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일부 악성 종양에서 분변 피루 베이트 키나아제 M2의 수준에 대한 조사

Ognerubov N.A., Milovanov V.V., Ivannikov A.A., Yezhova E.N.

탐 보브 주립 대학. G.R. Derzhavina
탐보 브 지역 종양 클리닉

이 기사는 42 명의 환자의 일부 악성 종양에서 M2 - pyruvate 키나아제 농도의 대변에서 결정한 결과를 제시합니다. 평균 대조군은 2.18 U / ml이었고, 결장 직장암에서는 6.97 U / ml였으며 통계적으로 유의미했다.
키워드 : 종양 M2 - 피루 베이트 키나아제, 악성 신 생물, 암로 검사

소개 : Pyruvate 키나아제는 활발히 증식하는 종양 세포에서 해당 과정에서 중요한 역할을합니다. 그것은 조직 특이성 (L, R, M1, M2)을 특징으로하는 다양한 이성체의 형태로 존재합니다. 타입 L 피루 베이트 키나아제는 간 및 근위 신장 세관에서 발견되며, 적혈구에서 R을 입력하고, 근육과 뇌에서 M1을 입력하고, 폐에서 M2를 입력합니다. 더욱이, pyruvate kinase M2 형은 계통 발생 학적으로 더 오래된 형태이다. 활성 형태에서, 모든 효소 아이소 폼은 4 개의 동일한 서브 유닛, 즉 사량 체이다. Isoenzyme M2 - pyruvate kinase는 활성이 높은 tetrarameric 형태와 거의 비활성 인 dimeric 형태로 존재할 수 있습니다. 증식하는 세포에서 피루브산의 4 량체와 2 량체 형태의 비율은 포도당이 에너지 생산으로 젖산으로 분해되는지 여부를 결정하거나, 대사 경로가 합성 과정으로 전환 될지 여부를 결정합니다. M2 - pyruvate kinase에 대한 tetramer / dimer의 비율은 oncoproteins과 대사 산물에 의해 조절됩니다. 종양이 발생하면 초기 조직 특이 적 이소 효소의 수가 감소하고 종양 세포가 M2 형 피루 베이트 키나아제를 대량 생산하기 시작합니다. 동시에, 초기에 4 개의 소단위로 구성된 이소 효소는 낮은 활성을 갖는 이량 체로 분할된다. 종양 세포의 특징 인 M2- 피루 베이트의 이량 체 형태는 종양 M2- 피루 베이트 키나아제로 불려왔다. 세포 분열 과정이 매우 활발한 종양에서는 세포가 에너지를 보존하기 위해 소위 "신진 대사 분절"을 선호합니다. M2- 피루브산 염기 키나아제의 이량 체화는 인산화 또는 온 콜 프로틴의 직접 결합으로 인하여 발생하며, 핵산, 인지질 및 아미노산의 합성에서 포도당의 경우와 유사하게 효소의 활성을 감소시킨다. Pyruavtkinase M 2 형은 종양 세포의 대사 변화의 중요한 조절 인자로 간주됩니다. 혈액, 대변을 입력하면이 매개 변수를 실험실 진단에서 종양 마커로 사용할 수 있습니다.
이 효소의 역할은 소화관, 유방, 폐, 신장의 종양 표지자, 급성 및 만성 염증 과정, 특히 대장의 종양 표지자로서 연구되어왔다. [3, 4, 5, 7, 9, 10, 11]. 이 방법의 민감도와 특이도는 각각 60-80 %와 80-90 %이다 [1, 2, 6]. 급성 및 만성 염증 과정, 심장 질환, 당뇨병 등에서도 M2 - pyruvate kinase의 수준이 증가한다 [10, 11].
따라서 중증도 및 중등도의 궤양 성 대장염 환자에서 경감 기간과 비교하여 급성기에 M2- 피루 베이트 키나아제 농도가 유의하게 증가했다 [2]. 비 특이성 궤양 성 대장염에서 만성적 인 연속 경과 환자의 혈액에서 M2 - pyruvate kinase의 수준은 만성 반복적 인 경과에 비해 거의 2 배 높았다 [4, 5, 7].
대장 암 환자의 대변에서 M2 - pyruvate kinase의 농도는 건강한 개인이나 선종 성 폴립 환자보다 유의하게 높으며 종양의 크기와 정도와 상관 관계가있다 [14,16]. 지구 V.P.에 따르면. et al. (2005), Kari J. et all. (2008) pyruvate kinase M2 형은 매우 민감하고 단계 특이 적이기 때문에 대장 암 치료의 효과를 예측하는 지표로 사용될 수있다 [13,15].
현재 대변 M2 검사 - 피루 베이트 키나아제 (pyruvate kinase)는 위험 집단에서 대장 암의 선별 검사로 사용됩니다 [12].

이 연구의 목적은 일부 악성 종양에서 대변에서 종양 M2 - pyruvate kinase의 수준을 결정하는 것이 었습니다.
재료 및 방법.
ScheBo Biotech AG 진단 키트를 사용하여 대변에서 종양 M2 - 피루 베이트 키나아제의 농도를 결정 하였다 (scatological test). 이 연구는 TESAN 애셔 (미국)를 사용하는 마이크로 프로세서 컨트롤을 갖춘 TECAN (미국)의 자동 마이크로 플레이트 광도계 "Sunrise"에서 수행되었습니다.
종양 M2- 피루 베이트 키나아제에만 특이적인 최초 단일 클론 항체를 ELISA 플레이트의 웰 표면에 적용 하였다. 암 환자의 대변 샘플에 존재하는 종양 M2 - 피루 베이트 키나아제 또는 ELISA 키트의 종양 M2 - 피루 베이트 키나아제에 대한 표준은 이들 항체에 결합하여 플레이트 상에 고정화된다. 두 번째 유형의 모노클로 널 항체 (biotin과 접합 됨)는 다음 배양시 종양 M2 - pyruvate kinase에 결합합니다. 그런 다음 두 번째 유형의 바이오틴 항체에 결합하는 스트렙 타비 딘과 양 고추 냉이 퍼 옥시 다제의 복합체를 첨가했다. Horseradish peroxidase는 기질 인 TMB (3,3,5,5-tetramethylbenzidine)를 산화시켜 황색을 띄게됩니다. 결론적으로, 산화 된 TMB의 농도는 측광 학적으로 결정된다.
이 ELISA kit를 사용하면 M2 - pyruvate kinase 종양의 농도를 1 ~ 20U / ml 범위에서 측정 할 수 있으며, 판별 수준은 4U / ml입니다. 종양 M2 - 피루 베이트 키나아제의 연구 내 오차는 5 개의 대변 샘플 (3.8 - 19.7 U / ml)의 20 배 분석으로 측정되었다. 변동 계수의 평균치는 5.3 % (3.0-7.9 %)였다.
연구 대상 물질은 38 세에서 76 세 사이의 다양한 국소화 된 악성 신 생물로 고통받는 31 명의 환자의 대변 샘플이었고, 평균 연령은 47 세, 7 + 2.7 세였다. 남자 11 명 (35.5 %)과 여자 20 명 (64.5 %)이었다. 모든 환자에서 악성 신 생물의 진단은 형태 학적으로 확인되었다. 대조군으로, 38 세에서 65 세 사이의 실제 건강한 개인 11 명을 대상으로 대변을 조사한 결과, 44 세, 6 + 2.4 세의 중간 연령이었다. 모든 환자를 3 군으로 나누었다.
첫 번째 그룹은 위장관의 다양한 만성 질병으로 고통받는 환자, 즉 식도염, 위염 및 대장염 (궤양 성 대장염 제외)으로 대표됩니다. 중간 연령은 46.1 + 2.8 세 (35 - 62 세)입니다.
연구 당시 제 2 군 (13)의 환자는 악성 신 생물 (제 2 임상군)의 확진 된 진단을 받았다. 이 중 대장 암은 7 명, 난소 암은 3 명, 유방암, 흑색 종, 혀 암은 1 명이었다. 이 그룹의 평균 연령은 43.3 + 2.1 세 (43 - 73 세)였다.
세 번째 그룹은 대장 암, 신장 암 및 췌장암 (세 번째 임상 그룹)에 대한 특별한 치료를받은 환자 (8 명)로 구성되었습니다. 중간 연령은 54.7 ± 3.1 세 (43 - 76 세)였다.

결과 및 토론.
대조군을 포함한 다른 군의 환자에서 대변 종양 M2 - pyruvate kinase의 수준을 표 1에 나타내었다.
탭. 1.
다른 그룹의 환자에서 종양 M2 - 피루 베이트 키나제 수준.
그룹 환자 수 평균, U / ml 간격, U / ml
1 10 3.35 + 0.62 2.15 - 4.31
2 13 6.97 + 0.86 3.47 - 15.9
3 8 3.47 + 0.64 1.17 - 5.95
대조 11 2.18 + 0.39 1.51 - 4.01

대조군에서는 50 % 이상의 M2-pyruvate kinase 종양이 2 U / ml 미만이었고,이 지표를 초과 한 4 예에서만 평균 2.18 ± 0.39 U / ml이었다.
위장관 질환 (그룹 1)을 앓고있는 환자에서 M2 - pyruvate 키나제 종양의 수치는 평균 2.15에서 4.31로 평균 3.35 ± 0.62 U / ml였다. 6 명의 환자에서 3 U / ml를 초과했다.
확진 된 악성 종양 (그룹 2)을 가진 개인에서 매우 흥미로운 결과가 얻어졌습니다. 종양 M2 - pyruvate kinase의 농도는 3.47 ~ 15.9 U / ml였으며, 평균 6.97 ± 0.86U / ml였다. 대조군과의 차이는 통계적으로 유의 하였다 (p <0.05). 위에서 언급했듯이이 그룹에는 대장 암으로 고통받는 7 명의 환자가 포함되었습니다. 종양 M2 - 피루 베이트 키나아제 수준의 변동은 평균 8.28 ± 0.94 U / ml이었던 3.61 - 15.9 U / ml이었다. 모든 환자군과 관련하여 평균 농도 지시의 차이는 통계적으로 유의하다 (p = 0.05).
3 군 (추적 관찰 중)의 대변 암 M2 - pyruvate kinase의 평균 농도는 3.47 ± 0.64 U / ml이었고, 1 군의 환자와 실질적으로 차이가 없었다.
우리가 얻은 결과는 결장 직장암 스크리닝을 포함한 여러 가지 악성 종양의 진단에서 피루브산 염기 형 M2의 임상 적 중요성에 대한 국내외 문헌에 나와있는 정보와 일치합니다. 이 검사는 특히 질병을 발병 할 위험이 높은 개인의 경우보다 민감하고 구체적입니다.

결론 :
1. 종양 M2 - 인간의 대변에서 피루 베이트 키나제를 검출하고 정량 할 수 있습니다.
2. 분 변성 종양 M2 - pyruvate kinase의 농도는 다양한 악성 종양에서 유의하게 변동한다. 동시에 대장 암 환자에서 훨씬 높은 수준이 관찰됩니다.
3. 암 환자의 추적 관찰 조직에서 종양 M2 - 피루 베이트 키나아제의 정의를 사용할 수 있습니다.

대장 마커 피루 베이트 키나아제가 대변에서 증가했다.

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Pyruvate kinase M2, 전사 분석 및 속도

새로운 종양 마커 인 피루 베이트 키나아제 M2는 위장관 종양을 스크리닝하는 민감성 마커로 제안됩니다.

기쁘다! 스크린 마커는 그렇게 많지 않습니다.
종양 표지자 M2-Pyruvate kinase는 pyruvate kinase 효소의 isoform이며 암세포의 활성에 중요한 효소입니다. 마커는 혈액과 대변에서 모두를 감지합니다.
독일에서는 이미 암의 조기 발견을위한 많은 연구가 진행되고 있습니다. Pyruvate kinase M2는 대장 암에 걸린 모든 사람들에게 대장 내시경 검사와 동등하게 처방됩니다.
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해독 테스트

그렇다면 종양에 따라 피루 베이트 키나제 M2의 수치가 상승합니까?
혈장에서이 종양 마커를 결정할 때 다음과 같은 경우 표준 이상의 수준이 발생합니다 :

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그러나 위장 종양은 T-M2-PK뿐만 아니라 신장 종양, 폐암, 유방암, 자궁 경부암, 흑색 종을 증가시킬 수 있습니다.

따라서 혈액에서이 마커의 정의는 대변보다 정보가 적습니다. 대변 ​​마커는 위장관 종양에서만 가져옵니다.

피루 베이트 키나아제 M2의 배설 수준은 4 ng / ml를 초과해서는 안됩니다

Pyruvate kinase M2에 대한 대변의 연구는 종양 -M2-Pk-ELISA 방법에 의해 수행된다
대장 내시경 검사와 달리 환자는이 연구에 반대하지 않습니다.
종양 표지자의 수치가 높을수록 Duke에 따르면 대장 암의 병기가 높아집니다.
K-ras, p53, APC, MSI, "long DNA"의 새로운 유전자 검사에서도 비슷한 결과가 나타 났지만 모두 비싸다. 그래서 종양 피루 베이트 키나제 M2가 가격을 얻습니다! 공평하게 guayacoic acid로 숨겨진 혈액을 결정하는 것이 더 저렴하다는 점에 유의해야합니다.
이 검사는 암의 조기 발견에 광범위하게 사용하는 것이 좋습니다.

연구를 위해 대변을 수집하는 방법

• 연구 준비는 필수 사항이 아닙니다!
• 대변의 작은 부분을 용기에 담아 실험실로 보내야하며 가급적이면 다음 48 시간 이내에 보내야합니다.
• 컨테이너에 서명하는 것을 잊지 마세요!

시험은 냉동실의 냉장고에 보관할 수 있습니다. 연구 결과는 24-72 시간 내에 준비됩니다.
결과의 해석 : 종양 피루 베이트 키나아제 M2의 비율은 4 units / ml 이하이다

종양 M2- 피루 베이트 키나아제

종양 표지자 - 종양 세포를 포함하여 증식하는 중요한 효소. 대변에서 양의 결정은 위장관 종양의 조기 진단 및 모니터링에 사용됩니다 : 대장 암 및 맹장, 장으로 전이 한 전이 탐지. 이 분석은 궤양 성 대장염, 이형성 폴립, 유전성 질환, 소화관의 병리학 적 증상이있는 환자 (체중 감소, 식욕, 빈혈, 변비, 설사)가있는 50 세 이상의 위험 집단의 사람들을 대상으로 한 검사의 일환으로 처방됩니다. 생체 적합 물질 - 대변 샘플. 연구 방법 - ELISA. 정상 값은 4 U / ml 이하이다. 테스트 조건 - 최대 10 일.

종양 표지자 - 종양 세포를 포함하여 증식하는 중요한 효소. 대변에서 양의 결정은 위장관 종양의 조기 진단 및 모니터링에 사용됩니다 : 대장 암 및 맹장, 장으로 전이 한 전이 탐지. 이 분석은 궤양 성 대장염, 이형성 폴립, 유전성 질환, 소화관의 병리학 적 증상이있는 환자 (체중 감소, 식욕, 빈혈, 변비, 설사)가있는 50 세 이상의 위험 집단의 사람들을 대상으로 한 검사의 일환으로 처방됩니다. 생체 적합 물질 - 대변 샘플. 연구 방법 - ELISA. 정상 값은 4 U / ml 이하이다. 테스트 조건 - 최대 10 일.

Pyruvate kinase는 포도당 대사에 관여하는 효소입니다. 활성 형태의 모든 이성질체는 사량 체 (4 개의 하위 단위로 구성)입니다. 종양의 발달과 함께, 비정상적인 세포 분열로 인한 조직의 증식 - 활성 세포 증식이 발생합니다. 이 과정에는 많은 에너지가 필요합니다. 당 분해는 ATP 생산의 주 경로가되고 있습니다. 종양 세포는 테트라 머 (tetramer)와 다이머 (dimer)로 대표되는 M2-pyruvate kinase (TM2)라는 특수 효소 구조를 생성하기 시작합니다. 그것은 종양의 고도로 특이적인 표지자이지만 장기 특이성을 갖지는 않습니다. 종양 병리학의 종류에 따라 혈액 내 수준이 높아집니다. 실험실에서의 실험에서 배설물에 대한 연구가 확산되었습니다. 이러한 유형의 생체 물질에서 TM2의 증가는 결장 종양 및 전이를 나타냅니다.

적응증

종양 M2- 피루 베이트 키나아제는 소화관 종양이 발생하는 동안 배설됩니다. 연구의 민감성은 대장 암에서 가장 높습니다. 분석 표시의 목록은 다음과 같습니다.

• 대장 암의 위험 인자. 이 테스트는 50 세 이상의 사람들에게 흡연, 남용, 앉아있는 생활 방식, 유전적인 부담 및 궤양 성 대장염이있는 사람들에게 나타납니다. 최종 지시기를 사용하면 증상이 나타나기 전의 초기 단계에서 질병을 확인할 수 있습니다.
• 대장 암의 증상. 선암의 발생은 체중 감소, 식욕 감소, 철분 결핍 및 변의 장애로 나타납니다. 혈액은 대변에서 발견됩니다. 이 검사는 질병의 1 차 진단, 즉 침습적 절차의 타당성에 대한 질문에 대해 수행됩니다.
• 대장 선암. TM-2의 숫자는 종양의 크기에 비례하여 증가합니다. 분석은 확진 된 진단을받은 환자에게 할당되어 질병의 단계를 결정하고, 예측을하고, 수술 치료의 효과를 평가하고, 재발을 감지합니다.

분석의 결과는 진단의 최종 진술에 사용되지 않습니다. 지표의 가치가 증가함에 따라 환자는 추가적인 실험실 및 기악 검진을 받게됩니다.

분석 준비

생체 재료는 대변의 일부입니다. 울타리는 하루 중 언제든지 만들어집니다. 절차 준비를해야합니다.

1. 3 일 동안 소화관 운동 (아편 제, 칼슘 통로 길항제, 완하제), 대변 색 (황산 바륨, 철, 비스무트), 직장 수단 (좌약, 기름, 관장기)에 영향을주는 약물의 복용을 중지해야합니다. 투약 취소는 의사와 합의해야합니다.
2. 수집 전날에는 뚜껑이 달린 특수 살균 용기를 준비해야합니다.
3. 수술 전에 외부 생식기 및 항문 구역 화장실을 수행해야합니다.

창자를 비운 후에, 대변의 작은 부분은 콘테이너로 분리되어야한다. 생체 적합 물질은 48 시간 이상 냉장고에 저장됩니다. 연구는 ELISA에 의해 수행됩니다. 데이터 준비 조건 - 최대 10 일.

정상 값

분석의 참고 값은 0-4 U / ml이다. 규범의 경계는 시험의 특성에 따라 약간 다를 수 있습니다. 비율 인상은 흡연자에 따라 결정됩니다. 부정적인 결과를 해석 할 때 다음을 고려하십시오.

• 종양 M2- 피루 베이트 키나아제의 정상 수준은 대장 선암을 배제하지 않습니다. 검사 감도는 92 %입니다.
• 질병을 모니터링 할 때 부정적인 결과가 유리한 예후를 나타내며 재발 위험이 낮아 종양 조직을 제거하는 수술의 성공을 확인합니다.

증가율

TM-2의 숫자의 증가는 대장의 악성 종양에 특이하지 않습니다. 증가 이유는 다음과 같습니다.

• 대장 암. 결장, S 자 결장 및 직장의 악성 종양에서 가장 높은 비율이 발견됩니다.
• 양성 결장 병변. 마커의 수준은 폴립의 성장, 선종의 발전과 함께 증가합니다.
• 위장 암. 때로는 검사 점수가 증가하는 원인은 식도, 위, 소장, 담관 또는 췌장의 악성 신 생물입니다.
• 대장의 염증성 질환. 마커의 양은 농양과 함께 궤양 성 대장염과 크론 병의 만성 형태의 증식 단계에서 증가합니다.

이상 치료

대장의 종양 M2- 피루 베이트 키나아제는 대장 암의 표지자입니다. 이 분석을 통해 임상 및 임상 전 단계에서 최대 85 %의 환자를 확인할 수 있습니다. 지표의 크기와 종양의 크기의 상관 관계는이 연구가 병리를 모니터링하는 방법이됩니다. 결과를받은 후에는 종양 전문의 나 소화기 전문의와상의하여 추가 진단의 필요성에 대해 상담하고 치료 계획을 세웁니다.

5.1 혈청 표지자 Tu M2-PK를 측정하는 방법을 사용하여 비 궤양 성 대장 암 진단

최근 몇 년 동안 대장 암 (CRC)의 진단에 진전이있었습니다. 그러나 검사 중 CRC의 능동적 탐지 비율은 낮다 [...].

이것은 초기에 확인 된 환자, 즉 CRC의 단계 I-II가 30 % [...]를 초과하지 않는 과정의 소홀 이유 중 하나입니다.

그러나, 대변 중의 간혹 혈액으로 CRC를 검출하는 접근법은 적절하며, 이는 벤지딘 방법의 단점을 보지 못한 사람에게서 코 복사 헤모글로빈 (LH)의 검출을위한 효소 면역 측정법의 개발에 대한 이론적 근거였다. 배설물에서 배설물 (haptoblobin)과 복합체를 확인하기위한 시험도 개발되었는데, 이는 소화성 단백 분해 효소의 작용에 더 잘 견딘다. (6,14). CRC 검출에 대한 또 다른 접근법은 M2 형 pyruvate kinase 효소 (fT 및 M2-PK)의 종양 형태의 이량 체의 대변에서의 확인 일 수 있으며, 이는 저산소 상태 [...]에서 세포 호흡을 제공한다. CRC를 검출하기위한이 복사 마커의 가능성은 여러 연구에서 입증되었습니다 [...].

우리는 인간 대변 HHB / HP 복합체를 검출하는 새로운 효소 면역 검사법과 장의 폴립 환자에서 M2 형 피루브테이트 키나아제의 종양 형태를 기증자 그룹 (건강한 개인)과 비교하여 CRC 3와 관련하여 진단 민감도를 평가하는 작업을 수행했습니다.

hHL, hH1 / Hp 및 fTi와 M2-PK의 농도는 ScheB® Tu M2-PK ™ ELISA Sto® 1 검사 (ELISA Hb / Hp-Sompat1 ELISA Kit (Immunodiagnostic AG, Germany)를 사용하여 분석 한 결과 다음과 같은 식별 지표 (DL)를 사용 하였다 : - 2000,0ng / ml, Hp - 2000.0 ng / ml, fTu M2 - RK - 4.0 units / ml 이들 시험 시스템의 민감도의 하한값은 다음과 같습니다 : 447.0 ng / ml / h, 81.0 ng / ml / h 1.0 U / ml의 fT와 M2-PK (15). 장의 용종 환자 12 명과 기증자 47 명을 대상으로 대변 검사에서 마커의 함량을 측정 하였다.

검사 대상 집단의 대변에서 3 개 마커 (hNiT, hN nT / NNT 및 fT 및 М2-РК)의 수준을 연구 하였다. 이것은 첫 번째 단계에서 각 마커의 진단 민감도와 특이성에 대한 분석을 수행 한 다음 이들 기준에 따라 비교할 수있었습니다. 연구 유형 : 통제 그룹 (건강한 기증자)과 함께 무작위 연구를 엽니 다.

또한 새로운 scatological ELISA 검사의 임상 적 및 진단 적 중요성을 평가하여 CRC에 대한 종양 관련 표지자 fTu M2-PK의 대변에서 결정하였고 다음과 같은 과제가 해결되었습니다.

연구중인 fTu M2-PK 검사의 특이성을 평가하십시오.

● 비 ulcerated CRC를 적극적으로 탐지하기위한 프로그램을 검사하기 위해 대변에서 fTu M2-PK 검사를 사용할 수 있는지 평가하십시오.

● 치료받는 환자에서 질병 재발의 전임상 검출을 위해 fTu M2-PK를 사용할 가능성을 조사하십시오.

이 연구에는 두 그룹의 환자가 포함되었다. 한 그룹의 기증자 (건강한) -47 명의 환자와 확진 된 진단을 가진 환자 : 결장 폴립 -12 명.

환자와 기증자의 대변에 함유 된 함량의 초기 통계 분석 결과는 표에 제시되어있다. 5.1.

조사한 대변 중 hHb의 농도.

장 폴립에서 hHb 값의 범위는 최고 기록 수준이었고 45840.0 ng / ml로 밝혀졌으며 기증자에서 2437.0 ng / ml이었다. 공여자의 평균 hHb 농도는 787.3 ± 85.4 ng / ml 였고 폴립 환자의 경우 6482.2 ± 3948.7였다. 장 폴립과 기증자가있는 환자의 고위험군의 비율은 각각 25.0 %와 6.4 %였다. 배설물의 수준에 따른 검사의 분포는 대장 폴립 (75.0 %)과 배설물 (93.6 %)의 대부분이 2000.0 ng / ml 이하임을 보여 주었다. (정상 2000.0 ng / ml의 상한선에서) - 그림 5.1.

그림 5.1. 배설물의 hHb 수준에 따른 검사 분포.

검사 환자의 대변에서 복합 hHb / Hp의 함량.

그림 5.2. 배설물의 hHb 수준에 따른 검사 분포.

검사 된 다른 그룹의 대변에서 h / n 복합체의 함량을 측정 한 결과를 표에 나타내었다. 5.2. 장의 용종 환자에서이 마커의 값은 12,540.0 ng / ml, 즉 표준의 상한선의 6 배인 최대 기록 값을 구성하고, 기증자는 1281.0 ng / ml보다 낮았다. 간장 용종 (1355.8 ± 1030.9 ng / ml)과 기증자 그룹에서의 극히 낮은 (133.3 ± 27.1 ng / ml) 환자의 평균값은 그렇지 않았다. 장의 용종 환자에서 마커 h / Hr의 함량이 증가한 경우의 비율은 16.7 % 였고, 기증자는 0 %였다. 각 레벨 별 분포도는 그림 5.2에 제시되어있다. 이 마커의 수준은 모든 기증자와 대부분의 장의 용종 환자에서 20000.0 ng / ml를 초과하지 않았습니다. 20,000.0ng / ml 이상의 마커 농도는 기증자 그룹과 폴립 환자 그룹에 등록되지 않았습니다. 유사한 분석이 fTu M2-RK에 대해 수행되었다 (표 5.3, 그림 5.3).

배설물에서 fTu M2-PK 수준에 의해 조사 된 환자 분포

이 표지의 값의 범위는 폴립 (1.0-19.8 u / ml)에 대한 값의 범위입니다. 폴립을 포함한 5.2 units / ml의 평균값은 크게 다르지 않았고 공여자의 대조군 (2.3 ± 0.5 units / ml)보다 거의 2 배 낮았다. 일반적으로 기증자 그룹에서 증가 된 fTu 수준의 사례의 비율은 상대적으로 높았으며 18.9 % (47 개 중 7 개)였다. 이러한 결과는이 마커의 수준에 대해 조사한 환자의 분포에서도 얻어졌다 (그림 5.3 참조). 대부분의 공여자 (81.1 %)와 폴립 환자의 절반 이상 (58.3 %)에서 정상 범위 내의 fTu M2-RK 수치를 보였고, 그 중 마커 수준이 20.0 units / ml 이상인 경우는 없었다.

검사 대상자의 대변에서 fTu M2-PK의 수준.

위에 제시된 모든 데이터의 체계화 및 분석은 표에 제시되어있다. 5.4. 배설물을 발견하는 시험 시스템은 기증자에게 상대적으로 높은 특이성을 가지고 있음이 명백하다 (음성의 경우의 93.6 %). 대변에서 hHL / Hp 복합체를 나타내는 시험 시스템은 공여자에 비해이 연구에서 특이성을 가지며 100 %에 가깝습니다 (47 명의 부정적인 결과의 기증자 중 47 명).

배설물에 대한 fTu M2-PK 수준의 특이도는 81.1 %였다. 3 명의 마커 모두 동일한 환자의 대변에서 검사 되었기 때문에, 한 쌍의 마커가 양성인 경우의 증가를 고려하여, 마커 쌍의 민감도와 특이도를 평가할 수있었습니다. (표 5.4.)

참고 분자의 괄호 안의 - 마커의 수치가 높은 환자의 수; 분모에 - 모든이 그룹에서 검사.

진단 민감도는 이전과 비슷했고 쌍의 특이성은 정확히 동일하다는 것이 밝혀졌다. 우리는 대변 검사에서 Hb뿐만 아니라 Hb와도 관련이 있음을 배제하지 않고 이러한 결과를 설명합니다. 안타깝게도 세계에서 이러한 마커를 사용한 경험은 아직 작으므로 우리의 가정을 확인하거나 부정하는 자료는 없습니다.

Tu M2-PK를 범용 암 표지자 (OM)로 사용하려는 제안은 종양 세포가 급속한 암세포 증식으로 인해 신생 혈관 형성이 불충분 한 특수 신진 대사 (호기성 호흡에 대한 당뇨병 보급)를 가지고 있다는 생각에 기반하고 있습니다. 이 "종양"유형의 대사는 세포가 번식을 위해 필요한 에너지를 절약하기 위해 교환의 "모서리를 잘라내었다"는 사실을 특징으로합니다. 이러한 에너지 경로를 종양 세포에 제공하기 위해 특수 형태의 피루브산 인 키나아제 종양 RKM2 유형이 증가합니다. 즉, 악성 종양의 신진 대사 기능 덕분에 Tu M2-PK는 다양한 종양을 진단하고 다양한 암 환자를 모니터링하는 데 사용되어 치료의 유효성과 질병 재발의 전임상 탐지를 평가할 수 있다는 제안이있었습니다.

Tu M2-PK의 증가 된 혈장 농도는 유방, 폐, 췌장, 신장, 식도 등 많은 종류의 악성 종양에서 세포 대사의 기본적인 변화를 반영합니다. 다양한 악성 종양에서 마커 Tu M2-PK는 상대적으로 높은 민감도를 나타냅니다. 따라서, Tu M2-PK는 위장관 (장, 위, 췌장, 식도)의 장기 종양에 유망한 OM임이 밝혀졌습니다 [...]. J.Schneider와 G. Schulze는 결장 직장암에서 Tu M2-PK의 더 높은 민감성 (CEA에 비해)을 발견했다. [2] B. Zhang et al. 위암에서 CA 72-4보다 [...]. 대변에서 Tu M2-PK를 결정하기 위해 새로 개발 된 시험을 사용하여 P. Hardt와 K. Decker et al. 대장 암 환자의 배설물에서이 마커의 함량이 유의하게 증가했다. 이 검사에서 마커의 민감도와 특이도를 나타내는 지표는 각각 78 %와 82 %로 매우 높았으며, 대변 암이 대장 암 검진을 위해 Tu M2-PK 검사에 사용될 수 있다고 결론을 내릴 수있었습니다.

췌장암에서이 마커의 높은 감도 (78 %)가 검출되었고 Tu M2-PK 수준과 종양 과정의 유병률과의 좋은 상관 관계가 확인되었습니다 [...]. 폐암에서 J.Schneider et al.에 따른 Tu M2-PK의 감수성 전체적으로 58 %로 Cyfra 21-1 (48 %)보다 약간 높습니다 [...]. 또한, 이들 환자에서 악성 과정의 진행에 따라 Tu M2-PK 수준이 유의하게 증가한 것으로 나타났습니다. 따라서 저자는 Tu M2-PK 검사가 폐암 환자를 모니터링하는 데 적합 할 수 있다고 제안합니다.

유방암 환자에서 CA 15-3 및 CEA와 같은 OMs가 가장 많이 연구되고 있으며, 이들의 사용은 주로 전이 과정의 환자를 모니터링하여 치료 효과를 평가하는 것으로 만 제한됩니다. Liffler 등의 연구에서 유방암에 대한 Tu M2-PK의 감수성 (52 %)이 발견되었습니다. 또한 CA 15-3과 CEA 및 Tu M2-PK의 병합 요법은 임상 증상이 나타나기 전 87 %의 병의 진행을 예측할 수 있으므로 개별적으로 사용하는 것이 좋습니다.

다양한 종양의 OM 인 Tu M2-PK의 보편성에 관한 진술은 이론적으로 타당합니다. 동시에 MN의 진단과 암 환자의 모니터링을 위해이 마커를 사용하는 데 사용 된 기사의 대부분이 적기 때문에 더 많은 선언적 성격을 띤다. 동시에 누적 된 경험은 종양학에서 Tu M2-PK 사용의 전망을 나타냅니다. Tu M2-PK가 다수의 국소화 된 고형 종양의 능동적 인 검출에 적합한 스크리닝 타입 마커로 판명 될 수도 있다는 것을 배제 할 수 없다.

대변에서의 인간 헤모글로빈, 헤모글로빈 (haptoblobin)과 피루브테이트 키나제 (fTu М2-РК) 종양 형태의 복합체 인 3 가지 새로운 테스트의 진단 민감도와 특이성에 대한 연구. 장 폴립 환자와 조건부 건강 기증자의 경우 장 폴립 환자에서 배설물이 발견되는 경우가 있었다 (각각 25, 16.7 및 41.7 %). 기증자에 비례하여 hNaT와 hNaT / Нr의 특이도는 각각 93.6 %와 100 %로 fTu M2-RK 시험 시스템에서 81.1 %보다 약간 낮았다. 따라서 벤지딘 방법의 주요 단점이없는 상대적으로 단순한 비 침습성 효소 면역법을 사용하여 폴립 및 결장 및 직장의 다른 질병을 가진 환자를 적극적으로 식별 할 실제 가능성이 나타났다. 대장 선종, 악성 신 생물 및 위장관의 상부 및 기관의 다른 병리학 적 상태를 가진 환자의 검사실 검사 후, 특히 연구의 증대 및 재료의 축적이 증가함에 따라, CRC가 더 구체적 일 경우, Hp와 결합한 Hb는 단백질 분해 소화 효소의 작용에 내성이기 때문에 Hp 검사는 식도, 위 등의 악성 신 생물에 민감 할 수 있습니다. ENTOV. 장래성으로, 장벽 폴립의 진단을받은 환자에 관한 임상 자료를 축적 할 수있는 기회를 얻는 것은 흥미로운 일이 아니며,이를 바탕으로 위험 그룹을 식별 할 수 있습니다.

따라서 문헌 및 우리의 연구에 따르면, fTu M2-PK를 결정하기위한 scatological 테스트는 비 궤양 성 CRC의 능동적 인 탐지를 목표로하는 스크리닝 유형의 유망한 실험실 방법이 될 수 있습니다.

대변 ​​중 종양 표지자 -2 (종양 피루 베이트 키나아제)

대변 ​​중 종양 표지자 -2 (종양 피루 베이트 키나아제)

종양 표지자 -2 (TM-2, 종양 피루 베이트 키나아제)는 암의 표지자입니다.

종양 표지자 -2는 종양 세포에서 생산되는 전분 분해 효소 인 피루 베이트 키나아제의 이성체의 이량 체로 전암 및 대장 암의 조기 진단을위한 종양 표지자로 사용됩니다. 대장 암의 선별 표지자.

참조 값 (대변) :

성인 : 최대 4.0 U / ml.

향상된 결과의 해석 :

양성 종양 (선종 성 용종, 전암 용종) 또는 악성 종양 (선암, 장 벽의 암)의 존재 여부는 4.0 units / ml 이상. 환자의 종양 종양 마커 2의 결과에 대한 최종 마스터로부터 필수 사전 문자를 사용하여 프로모션 콜로니 코피를 수행하는 합리적인 이유!

TM-2에 대한 분석이 규정 될 때 :

· 흡연, 비만, 유전, 50 세 이상의 연령, 알코올 중독, 앉아있는 생활 습관, 궤양 성 대장염과 같은 대장 암 발병 위험을 증가시키는 요인이있는 환자.

결장암의 증상 : 체중 감소 및 식욕, 대변 혈액, 철 결핍 성 빈혈 (우측 종양의 국소화), 변비 또는 설사 (좌측 종양의 국소화).

TM-2에 대한 분석은 무엇입니까 :

• 이형성 폴립 및 결장 선암의 조기 진단.

결장의 선암의 단계를 결정하고 질병의 예후를 제공합니다.

· 수술 후 대장 선암의 재발을 진단한다.

출혈하는 종양의 검출을 위해서는 숨겨진 혈액 (면역 크로마토 그래피)과 종양 표지자 -2의 두 가지 지표를 사용하여 환자의 대변 표본을 연구하는 것이 좋습니다.

누가 연구를 배정합니다.

위장병 학자, 치료사, 종양 전문 의사, 일반의.

환자 준비.

특별한식이 요법을 준수하지 않아도됩니다 (숨겨진 혈액 검사와 함께 투여 한 경우 - 복용하기 48 시간 전에 아스피린과 철분 제제 섭취를 제외하고 월경 중 대변을 수집하지 마십시오). 하제 약의 섭취를 제거하고 퍼팅 72 시간 전에 대변 색에 영향을줍니다. 배설물은 용기의 부피의 1/3 이하의 양으로 스크류 캡과 숟가락이 달린 일회용 용기에 수거됩니다. 대변은 깨끗하고 건조하며 흡수성이없는 표면에서 수집해야합니다. 48 시간 내에 멸균 된 용기에 담아 시료를 실험실 (또는 수집 지점)에 가져 가십시오 (냉장 보관 장치가 필요 없음). 18 ~ 22 ° C의 온도에서 72 시간 동안 보관할 수 있습니다. 6 ~ 8 ℃의 온도에서 최대 4 주.

종양 표지 2 (TM 2) - 피루브산 염기

Tumor Marker 2 (TM 2)는 종양 세포에서 생산되는 전분 분해 효소 pyruvate kinase의 이성체의 이량 체로 전암 및 대장 암의 조기 진단을위한 종양 표지자로 사용됩니다.

러시아어 동의어

영어 동의어

종양 M2-Pyruvate 키나아제, 종양 M2-PK, 피루 베이트 키나아제 유형 M2.

조사 방법

Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA).

측정 단위

단위 / ml (밀리리터 당 단위).

어떤 생체 재료를 연구에 사용할 수 있습니까?

연구 준비 방법?

완하제의 사용, 직장 좌약, 오일의 도입, 대변을 수집하기 전에 장 운동성 (벨라돈 나 필로 카르 핀 등)에 영향을 미치는 의약품과 대변 색 (철, 비스무트, 황산 바륨)의 사용을 72 시간 동안 제한하십시오.

연구에 관한 일반 정보

종양 표지자 2 (TM 2)는 해당 분해 반응에 관여하는 피루브산 염기 효소의 이소 형 중 하나의 이량 체입니다. 정상 세포에서는 소량의 단량체로 존재하지만, 종양 세포에서는 상당량의 효소가 이량 체 (TM-2)로 생성됩니다. 해당 glycolysis 효소의 높은 농도는 적극적으로 종양 세포를 증식시키는 에너지 비용을 제공합니다. 전 암성 질환과 대장 암의 발달로 대변에서 TM-2가 검출되어 종양 마커로 사용될 수 있습니다.

결장암은 모든 악성 종양 중에서 유병률과 사망률면에서 3 위입니다. 50 세 이상인 사람들은 유전성 증후군 (장의 선종 성 용종증, 린치 증후군 등)이있는 경우보다 감염되기 쉽지만,이 병은 35-45 년 내에 나타납니다.

결장암의 조기 발견을위한 황금 표준은 대장 내시경 검사입니다. 그러나 비 침습적 인 방법 인 대변에서의 TM-2 분석과 달리 침습성 및 관련 위험이 있으므로 선별 검사로 사용할 수 없습니다.

pyruvate kinase 검사는 다른 비 침습적 방법에 비해 몇 가지 장점이 있습니다. 잠혈에 대한 대변 분석에서 heme의 존재가 확인되면이 연구에서 종양 특이 적 효소가 검출되므로 출혈 및 비 출혈 종양을 모두 감지 할 수 있습니다. 이 특징은 시험의 더 높은 감도를 일으킨다 (비교를 위해 : TM-2를위한 시험의 감도는 92.3 %이고, 숨겨진 혈액을위한 대변 분석 - 20-35 %). 분변 잠혈 검사와는 달리,이 검사의 결과는식이 요법 준수에 달려 있지 않고 환자에게 훨씬 편리한 단일 생체 재료를 복용함으로써 얻을 수 있습니다. 또한 분석 결과는 비 스테로이드 성 소염제 및 비타민 C, 위염, 소화성 궤양, 장의 게실증 및 치질의 섭취에 의해 영향을받지 않으므로 가양 성 결과는 거의 배제됩니다.

TM-2에 대한 연구는 결장암의 증상뿐만 아니라 발달 위험 인자 (흡연, 비만, 유전, 50 세 이상, 알코올 남용, 좌식 생활 습관, 궤양 성 대장염)를 가진 환자에게도 적용됩니다. 대변 ​​중 TM-2의 농도는 종양의 성장에 비례하여 증가합니다. 따라서, TM-2에 대한 연구는 질병의 단계와 예후를 결정하는데 사용될 수있다. 원칙적으로 대장 암의 수술 적 치료 후 대변에서 TM-2의 농도는 정상으로 회복됩니다. 수술 후 양성 결과를 다시 얻거나 TM-2가 증가하면이 병의 재발이있을 수 있습니다.

긍정적 인 검사 결과는 장의 종양의 존재를 시사하지만 최종 진단을 확립하지는 않습니다. 진단을 확인하기 위해,이 결과를 가진 환자는 추가 실험실 검사 및 기악 검사를 위해 참조되어야합니다.

연구에 사용 된 것은 무엇입니까?

• 이형성 폴립 및 결장 선암의 조기 진단.
• 결장의 선암의 단계를 결정하고 질병의 예후를 제공합니다.
• 수술후 대장 선암의 재발을 진단하기 위함.

연구 일정은 언제 정해 집니까?

• 환자가 흡연, 비만, 유전, 50 세 이상의 연령, 알코올 남용, 좌식 생활 습관, 궤양 성 대장염과 같은 대장 암 발병 위험을 증가시키는 요인이있는 경우.
• 대장 암 증상 : 식욕 부진, 대변 혈액 분비, 철 결핍 성 빈혈 (우측 종양의 국소화), 변비 또는 설사 (좌측 종양의 국소화).

결과는 무엇을 의미합니까?

기준치 : 0 - 4 U / ml.

pyruvate 키나제를 증가시키는 이유 :

• 이형성 폴립;
• 대장 암, S 자 결장암 또는 직장암.

pyruvate kinase의 수준을 낮추는 것은 진단 적으로 중요하지 않습니다.

결과에 어떤 영향을 미칠 수 있습니까?

TM-2의 수준은 흡연 환자 및 궤양 성 대장염, 크론 병 및 결장 농양 환자에서 높아진다.

중요한 메모

분석 결과는 다른 실험실 및 도구 연구의 데이터를 고려하여 해석해야합니다.

추천

누가 연구를합니까?

종양 전문 의사, 위장병 전문의, 외과 의사, 일반의.

문학

• Koss K, Maxton D, Jankowski JA. 결장 직장암과 폴립에서의 대변이 량체 인 M2 pyruvate kinase는 종양 병기와 수술 적 개입과 관련이있다. Colorectal Dis. 2008 Mar; 10 (3) : 244-8.
• Hathurusinghe HR, Goonetilleke KS, Siriwardena AK. 위장관 악성 종양의 바이오 마커 인 종양 M2 피루 베이트 키나아제 (종양 M2-PK)의 현재 상태. Ann Surg Oncol. 2007 Oct; 14 (10) : 2714-20.
• Haug U, Rothenbacher D, Wente MN, Seiler CM, Stegmaier C, Brenner H. 종양 M2-PK. 대장 암으로 확인 된 성인의 대규모 샘플. Br J 암. 2007 5 월 7 일; 96 (9) : 1329-34.
• Tonus C, Neupert G, Sellinger M. 비 침습 대사 생검 배 분비 종양 M2-PK에 의한 대장 암 검진. World J Gastroenterol. 2006 Nov 21; 12 (43) : 7007-11.
• Young GP, Cole S. 대장 암에 대한 새로운 대변 검진 검사. 소화. 2007; 76 (1) : 26-33.

종양 M2 피루 베이트 키나아제

설명

분비물에있는 종양 M2- 피루 베이트 키나아제 (Tu M2-PK)는 종양 세포의 특정 "신호"입니다. 이 종양 표지자는 피루브산 염기 효소의 일종입니다. 대부분의 암은이 화합물에 의해 특징 지어 질 수 있습니다. 대장에서이 종양 마커의 배출은 발암 또는 대장의 전 암성 질환의 특징입니다.

종양 피루 베이트 키나아제 검사는 왜 필요합니까?

종양 M2- 피루 베이트 키나제의 함량을 측정하기 위해 종양의 조기 진단, 전이 또는 종양 재발의 가능성을 가능하게합니다.

적응증

• 이형성 폴립 및 결장 선암의 조기 진단.
• 결장의 선암 단계를 결정하고 질병의 예후를 제공하십시오.
• 수술 후 대장 선암의 재발 여부 진단

환자가 흡연, 비만, 유전, 50 세 이상의 연령, 알코올 남용, 좌식 생활 습관, 궤양 성 대장염과 같은 대장 암 발병 위험을 증가시키는 요인이있는 경우.

대장 암 증상 : 식욕 부진, 대변 혈액 분비, 철 결핍 성 빈혈 (우측 종양의 국소화), 변비 또는 설사 (좌측 종양의 국소화).

준비
분석을위한 대변은 자연적으로 얻어야한다. 이 연구를 수행하기 위해서는 2 ~ 3 티스푼의 생체 재료를 실험실에 가져 오는 것으로 충분합니다. 대변을 특수 용기에 넣고 수집 후 3 시간 이내에 실험실에 배달합니다.

대변은 관장과 완하제를 사용하지 않고 얻어야합니다.

결과의 해석
측정 단위 : U / ml

지표 Norm (U / ml)
0-90 세 여성 표시기

종양 M2-pyruvate kinase (대장 암 표지자), (대변 검사)

개최 장소 : Tonus

마감일 : 10 근무일

+ 물자 섭취 200 문질러.

+ 가정에서 울타리 분석 (니즈니 노브 고로드 만) 200 문질러.

M2 - 피루 베이트 키나아제는 대사성 종양 표지자 (종양 마커)의 종류에 속하는 효소입니다. 효소 pyruvate kinase는 일반적으로 tetrameric 구조를 가지고 있으며 건강한 세포의 대사 과정에 관여합니다. 양성 또는 악성 종양 과정의 발달과 함께 영향을받는 세포는 효소 - 종양 M2 - 피루 베이트 키나아제의 이량 체 형태를 생성합니다.

종양 pyruavtkinase M2 형은 종양 세포의 대사 변화의 주요 조절 인자로 여겨집니다. 그것은 혈액과 대변을 입력하기 때문에이 매개 변수를 종양 학적 과정의 마커로 사용할 수 있습니다.

종양 M2 - 피루 베이트 키나아제는 대장 암의 조기 진단과 장내 다른 국소 암 전이 및 전암 질환 - 장 점막의 양성 종양 (선종 성 용종 등)의 종양 표지자로 사용됩니다. 결장 직장암 환자의 대변에서 종양 M2 피루 베이트 키나아제의 농도는 건강한 개인 또는 선종 성 폴립 환자보다 유의하게 높았다. 폴립에서는 효소 수치도 상승하지만 종양은 종양보다 적습니다. 결장 직장암에서 M2-pyruvate kinase 종양의 크기는 종양의 크기와 악성 종양의 정도와 관련이있다.

대장에서 M2 - pyruvate kinase의 정량 분석은 높은 민감도 (80 ~ 90 %)뿐만 아니라 단계별 특이성 (선암의 단계를 결정할 수 있음) 즉 대장 암 및 직장암 치료의 예측 인자로 사용될 수 있습니다.

분변 M2- 피루 베이트 키나제 검사는 현재이 질환을 앓을 위험이있는 환자의 대장 암 선별 검사로 사용됩니다.

종양 피루 베이트 키나아제 M2- 유형의 농도 측정은 단클론 항체를 사용하는 ELISA (효소 면역 측정법)를 사용하여 수행됩니다. 연구 자료는 대변입니다.

종양 M2 - 피루 베이트 키나제에 대한 분석을 통과하기 전에 환자는 다음과 같은 요구 사항을 포함하는 특별한 훈련이 필요합니다.

• 종양 M2 - 피루브산 염기 키나제에 대한 검사를 받기 전에, 세척 용 관장제와 완하제를 사용하지 않아야합니다. 분석을위한 대변은 자연적으로 얻어야합니다.
• 2 ~ 3 티스푼의 생물학적 물질이 연구를 위해 수집됩니다. 그런 다음 특수 용기에 넣고 수집 한 후 3 시간 이내에 실험실로 배달합니다.
• 연구하기 전에 스트레스와 육체 운동을 피하는 것이 좋습니다.
• 재료는 수집 후 3 시간 이내에 실험실로 전달되어야합니다.

• 이형성 폴립 및 결장 선암종의 조기 진단;
• 결장 선암 및 질병 예후의 단계 결정;
• 수술 후 대장 선암의 재발 여부 진단

M2 - pyruvate kinase (4.0 U / ml 이상)의 상승 된 수준은 다음과 함께 가능합니다 :

• 결장암, 직장, S 상 결장암
• 비 특이성 궤양 성 대장염 및 급성기의 다른 염증성 장 질환
• 대장 농양
• 이형성 결장 폴립

효소 수준의 감소는 진단 적으로 중요한 기준은 아니다.